Animal Կենդանական հյուսվածքների օպտիմիզացված բուֆերները գործընթացը դարձնում են պարզ և հարմար:
■ Եզակի DNase I- ը նվազագույնի է հասցնում գենոմային ԴՆԹ -ի աղտոտումը:
■ Բարձր մաքրությամբ և պատրաստ օգտագործման ՌՆԹ-ն հարմար է ստորին հոսանքի զգայուն ծրագրերի համար:
Phen Ֆենոլի/քլորոֆորմի արդյունահանում, LiCl և էթանոլի տեղումներ և CsCl գրադիենտների ցենտրիֆուգացում չի պահանջվում, ինչը գործընթացը դարձնում է անվտանգ և հուսալի:
■ RT-PCR:
■ Northern Blot, Dot Blot:
■ Իրական ժամանակի PCR:
■ չիպերի վերլուծություն:
■ PolyA սկրինինգ, in vitro թարգմանություն, RNase պաշտպանության վերլուծություն և մոլեկուլային կլոնավորում:
Բոլոր ապրանքները կարող են հարմարեցվել ODM/OEM- ի համար: Մանրամասների համար ՝սեղմեք Անհատականացված ծառայություն (ODM/OEM)
Նյութը ՝ 20 մգ սաղմ (13 օր), 15 մգ երիկամ, 10 մգ լյարդ, 15 մգ փայծաղ, 10 մգ թիմուս, 20 մգ թոքեր Մեթոդ. Առնետի տարբեր հյուսվածքների նմուշներից ընդհանուր ՌՆԹ -ն մաքրվել է RNAprep Pure Tissue Kit- ի միջոցով: Արդյունքներ. Ագարոզայի գելի էլեկտրոֆորեզի պատկերը ներկայացված է վերևում: 2-4 μl 100 μl eluates- ը բեռնվել է մեկ գոտի: M: TIANGEN DNA Marker III; 1-2 նրբ. Սաղմ (13 օր); Նրբանցք 3. Երիկամ; 4-6 նրբ. ՝ լյարդ; 7 -րդ ուղի `փայծաղ; 8 -րդ ուղի `Տիմուս; 9 -րդ նրբ. Թոք. Էլեկտրոֆորեզը կատարվել է 6 Վ/սմ 30 րոպե 30 րոպե 1% ագարոզ գելի վրա: |
A-1 Բջջի լիզացումը կամ համասեռացումը բավարար չէ
---- Նվազեցրեք նմուշի օգտագործումը, ավելացրեք լիզի բուֆերի քանակը, ավելացրեք համասեռացման և լիզացիայի ժամանակը:
A-2 Նմուշի գումարը չափազանց մեծ է
---- Նվազեցրեք օգտագործված նմուշի քանակը կամ ավելացրեք լիզի բուֆերի քանակը:
A-1 Բջջի անբավարար լիզիզացում կամ համասեռացում
---- Նվազեցրեք նմուշի օգտագործումը, ավելացրեք լիզի բուֆերի քանակը, ավելացրեք համասեռացման և լիզացիայի ժամանակը:
A-2 Նմուշի գումարը չափազանց մեծ է
---- Խնդրում ենք անդրադառնալ մշակման առավելագույն հզորությանը:
A-3 ՌՆԹ-ն ամբողջությամբ չի հանվում սյունակից
---- RNase-Free ջուր ավելացնելուց հետո թողեք այն մի քանի րոպե առաջ ՝ կենտրոնախույս անելուց առաջ:
A-4 էթանոլը լույսի մեջ
---- Լվանալուց հետո նորից ցենտրիֆուգացրեք և հնարավորինս հեռացրեք լվացքի բուֆերը:
A-5 Cell մշակման միջավայրն ամբողջությամբ հեռացված չէ
---- Բջիջներ հավաքելիս խնդրում ենք հնարավորինս հեռացնել մշակույթի միջավայրը:
A-6 RNAstore- ում պահվող բջիջները արդյունավետորեն չեն ցենտրիֆուգացվում
---- ՌՆԱ խանութի խտությունը ավելի մեծ է, քան բջիջների միջին մշակման միջավայրը. ուստի կենտրոնախույս ուժը պետք է մեծանա: Առաջարկվում է ցենտրիֆուգացնել 3000x գ արագությամբ:
A-7 Lowածր RNA պարունակություն և առատություն նմուշում
---- Օգտագործեք դրական նմուշ `որոշելու համար, թե արդյոք ցածր եկամտաբերությունն առաջացել է նմուշից:
A-1 Նյութը թարմ չէ
---- Թարմ հյուսվածքները պետք է պահվեն հեղուկ ազոտի մեջ կամ անմիջապես դրվեն ՌՆԱ խանութի ռեակտիվի մեջ `արդյունահանման էֆեկտն ապահովելու համար:
A-2 Նմուշի գումարը չափազանց մեծ է
---- Նվազեցրեք նմուշի գումարը:
A-3 RNase վարակիչn
---- Թեև հավաքածուի մեջ տեղադրված բուֆերը չի պարունակում RNase, այն հեշտ է աղտոտել RNase- ը արդյունահանման ընթացքում և պետք է խնամքով մշակվի:
A-4 Էլեկտրոֆորեզի աղտոտում
---- Փոխեք էլեկտրոֆորեզի բուֆերը և համոզվեք, որ սպառվող նյութերն ու Loading Buffer- ը զերծ են RNase աղտոտումից:
A-5 Էլեկտրոֆորեզի չափազանց մեծ բեռ
---- Նվազեցրեք նմուշի բեռնման քանակը, յուրաքանչյուր ջրհորի բեռնումը չպետք է գերազանցի 2 մկգ:
A-1 Նմուշի գումարը չափազանց մեծ է
---- Նվազեցրեք նմուշի գումարը:
A-2 Որոշ նմուշներ ունեն ԴՆԹ-ի բարձր պարունակություն և կարող են բուժվել DNase- ով:
---- Կատարեք RNase-Free DNase բուժում ստացված ՌՆԹ լուծույթին, և ՌՆԹ-ն կարող է ուղղակիորեն օգտագործվել բուժումից հետո հետագա փորձերի համար, կամ կարող է հետագա մաքրվել ՌՆԹ-ի մաքրման հավաքածուներով:
Ապակե իրերի համար, թխած 150 ° C ջերմաստիճանում 4 ժամ: Պլաստիկ տարաների համար `0,5 Մ NaOH- ի մեջ ընկղմվելով 10 րոպե, այնուհետև մանրակրկիտ լվանալ RNase- ջրով, այնուհետև մանրէազերծել` RNase- ն ամբողջությամբ հեռացնելու համար: Փորձի ժամանակ օգտագործվող ռեակտիվները կամ լուծույթները, հատկապես ջուրը, պետք է զերծ լինեն RNase- ից: Ռեակտիվների բոլոր պատրաստուկների համար օգտագործեք RNase- ջուր (ջուր ավելացրեք մաքուր ապակե շշի մեջ, ավելացրեք DEPC- ը 0,1% (V/V) վերջնական կոնցենտրացիային, թափահարեք մեկ գիշեր և ավտոկլավ):
Ստեղծման օրվանից մեր գործարանը մշակում է առաջին համաշխարհային կարգի արտադրանք ՝ պահպանելով սկզբունքը
որակի առաջին հերթին: Մեր արտադրանքը ձեռք է բերել գերազանց հեղինակություն արդյունաբերության մեջ և արժեքավոր վստահություն նոր և հին հաճախորդների շրջանում: