Մագնիսական կենդանիների հյուսվածքների գենոմային ԴՆԹ հավաքածու

A-1 Սկզբնական նմուշում բջիջների կամ վիրուսի ցածր կոնցենտրացիան. Հարստացրեք բջիջների կամ վիրուսների կոնցենտրացիան:

A-2 Նմուշների անբավարար լիզացում. Նմուշները մանրակրկիտ չեն խառնվել լիզի բուֆերի հետ: Առաջարկվում է մանրակրկիտ խառնել զարկերակային պտույտով 1-2 անգամ: - Բջջային անբավարար լիզիզմ, որը առաջացել է պրոտեինազ Կ – ի ակտիվության նվազման հետևանքով. Առաջարկվում է հյուսվածքը կտրել փոքր կտորների և երկարացնել լոգանքի ժամանակը `լիզատի բոլոր մնացորդները հեռացնելու համար:

A-3 ԴՆԹ-ի անբավարար կլանում: -Մինչև լիզատը պտտման սյուն տեղափոխելը, ոչ մի էթանոլ կամ 100 տոկոս էթանոլի փոխարեն ցածր տոկոս չի ավելացվել:

A-4 Էլլացիոն բուֆերի pH արժեքը չափազանց ցածր է: -pH- ը կարգավորեք 8.0-8.3-ի սահմաններում:

Մնացորդային էթանոլը լույսի մեջ:

- Լվացքի մեջ կա լվացքի մնացորդային բուֆերային մնացորդ: Էթանոլը կարող է հեռացվել ՝ պտտվող սյունը կենտրոնախույս պահելով 3-5 րոպե, այնուհետև սենյակային ջերմաստիճանում կամ 50 ℃ ինկուբատորում տեղադրելով 1-2 րոպե:

A-1 Նմուշը թարմ չէ: - Արդյունքում հանեք ԴՆԹ -ի դրական նմուշ `ստուգելու համար, թե արդյոք նմուշի ԴՆԹ -ն քայքայվել է:

A-2 Անպատշաճ նախնական բուժում: - Պատճառը հեղուկ ազոտի ավելորդ մանրացումն է, խոնավության վերականգնումը կամ նմուշի չափազանց մեծ քանակությունը:

Տարբեր նմուշների համար նախնական բուժումները պետք է տարբերվեն: Բույսերի նմուշների համար համոզվեք, որ մանրակրկիտ մանրացրեք հեղուկ ազոտի մեջ: Կենդանիների նմուշների համար միատարրացրեք կամ մանրակրկիտ մանրացրեք հեղուկ ազոտի մեջ: Դժվար ջարդվող բջջային պատերով նմուշների համար, ինչպիսիք են G+ բակտերիաները և խմորիչը, առաջարկվում է բջջի պատերը կոտրելու համար օգտագործել լիզոզիմ, լիտիկազ կամ մեխանիկական մեթոդներ:

4992201/4992202 Բույսերի գենոմային ԴՆԹ հավաքածուն ընդունում է սյունակի վրա հիմնված մեթոդ, որը քլորոֆորմ է պահանջում արդյունահանման համար: Այն հատկապես հարմար է բույսերի տարբեր նմուշների, ինչպես նաև բույսերի չոր փոշու համար: Hi-DNAsecure Plant Kit- ը նույնպես սյունակ է, բայց առանց ֆենոլ/քլորոֆորմ արդյունահանման անհրաժեշտության `այն դարձնելով անվտանգ և ոչ թունավոր: Այն հարմար է բարձր պոլիսաքարիդներով և պոլիֆենոլ պարունակությամբ բույսերի համար: 4992709/4992710 DNAquick Plant System- ն ընդունում է հեղուկի վրա հիմնված մեթոդ: Ֆենոլ/քլորոֆորմ արդյունահանումը նույնպես անհրաժեշտ չէ: Մաքրման ընթացակարգը պարզ է և արագ `առանց նմուշի սկզբնական քանակների սահմանափակման, այնպես որ օգտվողները կարող են ճկուն կերպով ճշգրտել գումարը` ըստ փորձարարական պահանջների: Մեծ եկամտաբերությամբ կարելի է ձեռք բերել gDNA բեկորների մեծ չափսեր:

Գենոմային ԴՆԹ -ն մարդու ամբողջ արյան նմուշների տարբեր ծավալներից հանվել է TIANamp Blood DNA DNA Kit- ի միջոցով: Արդյունքները հետեւյալն են. Արդյունքները թվարկված են միայն որպես տեղեկանք, արդյունահանման իրական արդյունքները կախված են նմուշների պայմաններից:

Արյան խցանումների ԴՆԹ -ի արդյունահանումը կարող է իրականացվել այս երկու հավաքածուներում տրամադրված ռեակտիվների միջոցով `պարզապես արձանագրությունը փոխելով արյան խցանումների ԴՆԹ -ի արդյունահանման հատուկ հրահանգի: Արյան խցանումների ԴՆԹ -ի արդյունահանման արձանագրության փափուկ պատճենը կարող է տրվել խնդրանքով:

Կասեցրեք թարմ նմուշը 1 մլ PBS- ով, սովորական ֆիզիոլոգիական լուծույթով կամ TE բուֆերով: Ամբողջությամբ համասեռացրեք նմուշը հոմոգենացնողի միջոցով և նստվածքը հավաքեք խողովակի ներքև ՝ ցենտրիֆուգման միջոցով: Մաքրեք գերեզմանոցը և նորից նստեցրեք նստվածքը 200 μl բուֆերային GA- ով: Հրահանգի համաձայն կարող է իրականացվել ԴՆԹ -ի հետևյալ մաքրումը:

Պլազմայի, շիճուկի և մարմնի հեղուկների նմուշներում gDNA- ի մաքրման համար խորհուրդ է տրվում TIANamp Micro DNA DNA Kit: Շիճուկի/պլազմայի նմուշներից վիրուսի gDNA- ի մաքրման համար խորհուրդ է տրվում TIANamp Virus DNA/RNA Kit: Շիճուկի և պլազմայի նմուշներից բակտերիալ gDNA- ի մաքրման համար խորհուրդ է տրվում TIANamp Bacteria DNA Kit (լիզոզիմը պետք է ներառվի դրական բակտերիաների դեպքում): Թքի նմուշների համար խորհուրդ է տրվում Hi-Swab DNA Kit և TIANamp Bacteria DNA Kit:

DNAsecure Plant Kit- ը կամ DNAquick Plant System- ը խորհուրդ են տրվում սնկերի գենոմի արդյունահանման համար: Խմորիչ գենոմի արդյունահանման համար խորհուրդ է տրվում TIANamp Yeast DNA Kit (լիտիկազը պետք է ինքնուրույն պատրաստվի):